"Российский аллергологический журнал", 2012, №1, вып.1, стр. 164-165.

Труды Национальной конференции "Клиническая иммунология и аллергология - практическому здравоохранению"  20-21 фев. 2012г., Москва

Кочиш Л.Т., Мухортых О.Ю., Бегаева Н.Н., Верлыго Е.А.

ООО«Вега» Группы компаний«АлкорБио», Санкт-Петербург. 

THE RESULTS OF THE COMPARATIVE RESEARCH OF TEST-SYSTEMS «AllergoIEA – SPECIFIC IgE» LTD «ALKORBIO COMPANY» AND «UNICAP SYSTEMS» PHADIA

L.Kochish, O.Mukhortyh, N.Begaeva, E.Verlygo.

LTD «Vega», AlkorBio, Saint Petersburg.

Введение

По данным разных авторов, как в России, так и за рубежом [1, 2, 3, 5] до 40% населения страдают аллергическими заболеваниями, обусловленными преимущественно иммунными механизмами с участием специфических к различным аллергенам иммуноглобулинов Е (sIgE). Распространенность аллергии определяет усилия по созданию и совершенствованию систем и средств определения уровня или концентрации sIgE [2, 3, 5].

Методы лабораторной аллергодиагностики базируются на достижениях иммуноферментного анализа (ИФА). В 90-е годы в Европе был разработан метод количественного определения sIgE, в котором использовалась твердая фаза с адсорбированными специфичными к IgE антителами и биотинилированные аллергены [2, 4, 5]. Дальнейшее развитие этот метод, названный реверсивным аллергосорбентным тестом, получил в группе компаний «Алкор Био» (Санкт-Петербург, Россия) и был реализован в наборе «АллергоИФА-специфические IgE» с биотинилированными аллергенами [1].

Анализ выполняется на полистироловых планшетах в стандартной технике ИФА. Удобства исследований достигаются за счет использования единого для всех аллергенов иммуносорбента –планшета, в лунках которого иммобилизованы анти-IgE антитела. Создание иммуносорбента на основе антител, а не фиксированных на твердой фазе аллергенов, придает анализу гибкость, способность к формированию произвольного репертуара аллергенов по показаниям врача, а также снижает неспецифические реакции. Аллерген же несет на себе биотиновую метку и проявляетcя на твердой фазе в составе иммунных комплексов с sIgE и конъюгатом, специфичным к биотинус пероксидазой хрена. Результаты анализа регистрируются на планшетном фотометре.

Цель исследования: оценить специфичность и чувствительность ряда аллергенов тест-системы «АллергоИФА –специфические IgE» по отношению к таковым с референтной тест-системой «UniCAP System», а также сравнить частоту совпадений результатов анализов обеих этих систем с результатами кожных скарификационных проб.

Материал и методы исследования

Исследование проведено в Санкт-Петербурге на базе лаборатории аллергологии ООО «Вега» Группы компаний «АлкорБио». Клинический материал собран в клинике детских болезней Военно-медицинской академии им. С.М.Кирова и в ГУЗ «Детская городская больница №1».

В первой части исследования проведено сравнение специфичности и чувствительности 10 одноименных аллергенов двух сравниваемых тест-систем: Derm. Pteronyssinus (d1,), Derm. Farinae (d2), домашняя пыль (h1), эпителий кошки (e1), плевел (g5), тимофеевка луговая (g6), ольха серая (t2), береза бородавчатая (t3), лещина (t4), полынь обыкновенная (w6). Для этого были использованы 767 сывороток крови пациентов (от 56 до 96 сывороток на каждый из 10 аллергенов). Результаты анализов с референтной тест-системой «UniCAP System» дали 383 положительных и 384 –отрицательных результатов. Затем были изучены показатели (в %) специфичности и чувствительности аналогичных аллергенов с набором реагентов «АллергоИФА –специфические IgE».

Во второй части исследования было проведено сравнение результатов 171 кожной скарификационной пробы (от 9 до 32 проб на каждый из изученных аллергенов), среди которых было 43 отрицательных и 128 положительных реакций, с результатами анализов сывороток крови этих пациентов, проведенных с использованием двух сравниваемых тест-систем.

Результаты

В первой части исследования были установлены высокие показатели специфичности и чувствительности тест-системы «АллергоИФА –специфические IgE» по отношению к сравниваемой в качестве эталона (референса) тест-системы «UniCAP РоссийскийSystem». В частности, специфичность различных аллергенов «АллергоИФА –специфические IgE» варьировала в пределах от 91% до 100%, а по пяти из них (g5, g6, t2, t3, w6) этот показатель был равен 100%. Чувствительность десяти изученных аллергенов из набора «АллергоИФА –специфические IgE» в сравнении с таковыми референтной тест-системы колебалась от 92% до 100%, а по двум аллергенам (h1 и g6) этот показатель составил 100%.

Во второй части работы была изучена частота совпадения результатов анализов, проведенных с использованием обеих сравниваемых тест-систем, с положительными и отрицательными реакциями кожных скарификационных проб. Было установлено, что для подавляющего большинства (9 из 10) аллергенов частота совпадений результатов определения sIgE с кожными пробами составила от 71% до 100% –у тест-системы «АллергоИФА –специфическиеIgE» и от 75 до 100% –у тест-системы «UniCAP System». Лишь по аллергену эпителия кошки (e1) совпадения с кожными пробами были отмечены менее чем в половине всех случаев и составили для обеих тест-систем по 47%.

Полное совпадение изученного показателя в обеих тест-системах было отмечено по 5 аллергенам (e1, g6, h1, t4, w6). По 4 аллергенам (d1, d2, t2, t3) больше совпадений с результатами кожных проб (на 4% –12%) было отмечено для референтной тест-системы «UniCAP System». По одному аллергену (g5) –на 8% больше совпадений с кожными пробами было получено для тест-системы «АллергоИФА –специфические IgE».

Выводы

1. Изученные аллергены для тест-системы «АллергоИФА-специфический IgE» обладают высокой специфичностью (91% –100%) и достаточной чувствительностью (92% –100%) по сравнению с референтной тест-системой «UniCAP System».

2. Указанные аллергены продемонстрировали высокую частоту совпадений в иммуноферментном анализе с результатами кожных проб, вполне сопоставимую с таковой у аллергенов референтной тест-системы.

3. Изученные биотинилированные аллергены с использованием тест-системы «АллергоИФА-специфический IgE» могут быть рекомендованы к применению в практической работе клинико-диагностических лабораторий.

ЛИТЕРАТУРА

1. Кочиш Л.Т. Высокотехнологичная компания “Алкор Био”: современный подход к разработке и производству иммуноферментных тест-систем для аллергодиагностики // Справочник заведующего КДЛ. –2011. –№4. –С. 33-36.

2. Соболев А.В., Аак О.В. Современная аллергодиагностика: опыт работы //Hi+Med. Высокие технологии в медицине. –2011. –Вып. №2. –С. 8-10.